orteza kolana warszawa

Ekspresja IL-18 była najbardziej widoczna wewnątrz i w sąsiedztwie agregatów limfocytarnych (Tabela 1) i została zademonstrowana przy użyciu dwukrotnego barwienia, głównie w makrofagach CD68 +. Zidentyfikowano również niewielką populację komórek CD68a, IL-18 +, prawdopodobnie reprezentujących fibroblasty (Figura 2d). Występy te były podobne do tych w ośrodkach rozrodczych w zapalnym ludzkim migdałku (dane nie pokazane). Barwienie IL-18 wykryto również wewnątrz i w sąsiedztwie warstwy wykładziny, chociaż na niższych poziomach (Tabela 1, Figura 2a). Podwójne barwienie wskazywało, że ta ekspresja IL-18 występowała głównie, ale nie wyłącznie, w makrofagach CD68 +. Limfocyty CD3 + były konsekwentnie ujemne (ryc. 2, c i d). Rozkład ten kontrastuje z innymi monoklinami, takimi jak IL-la, TNF-a lub IL-12, które są zwykle widoczne w makrofagach warstwowych (10, 11). Ekspresja IL-18 w komórkach śródbłonka była obecna w 9 z 18 zbadanych tkanek tylko na niskich poziomach (5. 7% naczyń na HPF). Małe białko IL-18 wykryto w błonach maziowych OA (tabela 1). Potwierdzającą immunohistologię przeprowadzono przy użyciu kolejnej serii 3 anty-ludzkich IL-18, pochodzących z oddzielnych klonów, które ujawniły identyczny, neutralizujący wzór barwienia w równoległych tkankach maziówkowych RA (dane nie przedstawione). Figura 2 (a) IL-18 wykryto immunochemicznie (brązowy) w błonie maziowej stosując przeciwciało anty-IL-18 (D3B6). (b) lokalizacja CD3 (brązowa) w równoległych sekcjach wskazuje na ekspresję IL-18 w agregatach bogatych w komórki T. Podwójne barwienie przeciwciałami anty. IL-18 (niebieski / czarny) i (c) anty-CD3 (brązowy) lub (d) anty-CD68 (brązowy), bez kontrastu jądrowego, zlokalizowane w IL-18 głównie na makrofagach CD68 +. (Czarna strzałka, podwójnie pozytywna, biała strzałka, jedno pozytywne IL-18). Tabela Immunolokalizacja IL-18 w błonie maziowejA Następnie poszukiwaliśmy dowodów na ekspresję IL-18R przy użyciu specyficznych odczynników. łańcuch. IL-18R. mRNA wykryto za pomocą RT-PCR w 10 z 10 badanych błon opłucnowych RA (Figura 3), ze specyficznością produktu potwierdzoną przez sekwencjonowanie. Komórkowa ekspresja IL-18R. białko scharakteryzowano za pomocą analizy FACS nie-przepuszczalnych komórek jednojądrzastych SF. Znaczące subpopulacje limfocytów CD3 + SF i makrofagów CD14 + wyrażały IL-18R (Figura 3). Figura 3 (a) Ekspresję mRNA receptora IL-18 wykryto za pomocą RT-PCR w 10 na 10 błonach maziowych RA (5 reprezentatywnych danych pokazano na liniach 1. 5). Komórki THP-1 stymulowane LPS służyły jako kontrola pozytywna. (b) Dane zbiorcze (średnia . SEM) w celu scharakteryzowania komórek IL-18R + w jednojądrzastych komórkach błony maziowej RA (n = 8 pacjentów). IFN-y indukowane IL-18 produkcja w błonie maziowej RA. Opisane efekty biologiczne IL-18 (26, 27) sugerują, że może on sprzyjać zapaleniu błony maziowej. W związku z tym zbadaliśmy wpływ IL-18 na syntezę cytokin przez tkanki maziówkowe RA in vitro. Same IL-18 i IL-12 indukowały niskie poziomy IFN-y synteza przez hodowle komórek jednojądrzastych SF lub zawiesin pojedynczych komórek pochodzących z błony maziowej (Figura 4). Taką syntezę zwiększano konsekwentnie dodając IL-18 w połączeniu z IL-12 (Figura 4, P = 0,005 dla komórek jednojądrzastych SF, P = 0,0002 dla zawiesin pojedynczych komórek pochodzących z błony maziowej). Inne prozapalne cytokiny mogą niezależnie oddziaływać z IL-18. Dlatego przetestowaliśmy zdolność IL-15, aktywowanej przez komórki T cytokiny, którą uprzednio wykryliśmy w błonie maziowej (28, 29), aby synergizować z IL-18. IL-15 okazała się tak silna jak IL-12 w połączeniu z IL-18 w celu promowania IFN-y. wytwarzanie przez tkanki maziówkowe in vitro (Figura 4). Ponadto, we wszystkich testowanych tkankach błony maziowej (n = 10) kombinacja IL-12, IL-15 i IL-18 okazała się optymalna w indukowaniu IFN-y. produkcja
[więcej w: badania prenatalne żory, avocado strzelce opolskie, koszałka tczew ]