warszawa ul wawelska szpital

Ponieważ NO może regulować odpowiedzi Th1 (32), testowaliśmy zdolność IL-18 do promowania wytwarzania NO w hodowlach błony maziowej. Znaczącą indukcję wytwarzania azotynów zaobserwowano w 9 z 9 badanych błon maziowych (medium .M w porównaniu z IL-18-14> 5,6 .M, P <0,008). Maksymalne wytwarzanie azotynów obserwowane przy koktajlu cytokinowym, IL-18 / IL-12 / IL-15 (29-7,4 .M), było znacznie wyższe niż uzyskane z samą IL-18 (P = 0,03). Skutki prozapalne IL-18 in vivo. Mysi CIA jest użytecznym modelem, w którym krytyczna rola cytokin, takich jak TNF-a i IL-1 zostały scharakteryzowane in vivo (11, 31). Użyliśmy CIA do zbadania, czy IL-18 może promować zapalenie stawów. Myszy DBA / immunizowane CII w IFA rozwinęły małą częstość łagodnego zapalenia stawów. Przeciwnie, myszy, w których rekombinowana mysia IL-18 była współpodawana podczas primingu CII / IFA (dzień <1 do dnia 4) i prowokacji (dzień 20 do 24 dnia) wykazywały wysoką częstość występowania i ciężkość zapalnego zapalenia stawów (P <0,01; ), która była porównywalna pod względem nasilenia do dnia 33, a częstość w dniu 73, do tej osiąganej u zwierząt z pozytywną kontrolą, które otrzymywały CII w CFA. Badanie histologiczne potwierdziło wystąpienie przerostu błony maziowej i zapalenia oraz zniszczenie chrząstki (dane nie pokazane). Dane te jasno pokazują, że IL-18 jest zdolna do promowania destruktywnego zapalnego zapalenia stawów. Tabela 2IL-18 w mysim rozporządzeniu CIA dotyczącym wytwarzania IL-18 w tkankach maziowych. Syntezę IL-18 opisano głównie z komórek monocytowych reagujących na produkty bakteryjne i prozapalne cytokiny. Chociaż mRNA IL-18 było łatwo wykrywane za pomocą RT-PCR, niestymulowane pierwotne hodowle błony maziówkowej nie powodowały konsekwentnego wytwarzania białka IL-18 na poziomach wykrywalnych w teście ELISA (czułość, 35 pg / ml) (Figura 6a), chociaż IL-6 była zawsze obecny (dane nie przedstawione). Dodawanie IL-1. i TNF-a indukował znaczącą produkcję IL-18 w 4 z 6 hodowli błony maziówkowej (Figura 6a). Ponieważ mRNA IL-18 ulegało konstytucyjnej ekspresji w makrofagach i w pierwotnych hodowlach maziówkowych, poszukiwaliśmy następnie komórek ujemnych pod względem mRNA IL-18 pochodzenia maziowego. Badanie histologiczne sugerowało, że mała populacja SFB może eksprymować IL-18 in situ. W związku z tym ustalono hodowle RA SFB, które nie eksprymowały mRNA IL-18, co umożliwiło nam bezpośrednie zbadanie czynników wymaganych do regulacji ekspresji genów nowej IL-18. Dodawanie TNF-a i IL-1. indukowała ekspresję mRNA IL-18 w 10 z 10 badanych linii SFB (Figura 6b). Indukcję ekspresji białka IL-18 zidentyfikowano immunohistochemicznie przy użyciu D3B6 (Figura 6, c i d), którego specyficzność została potwierdzona w tym układzie hodowli przez skuteczną uprzednią neutralizację rekombinowaną IL-18. Równoległe eksperymenty wykazały zwiększoną ekspresję IL-15, ale nie IL-12, oraz ekspresję mRNA i białka przez TNF-a. i IL-1. (dane nie pokazane). Łącznie dane te sugerują, że monokiny, regulowane w górę przez IL-18, mogą z kolei sprzyjać ekspresji genów IL-18 i wydzielaniu białka. Ponadto pod wpływem TNF-a i IL-1 (3, SFB mogą przyczyniać się do tego procesu, chociaż ich wpływ ilościowy może być niewielki. Figura 6 (a) IL-18 z hodowli błony maziowej reprezentatywnej dla 4 pozytywnych hodowli: 2 były negatywne. (b) Regulacja w górę mRNA IL-18 w liniach komórkowych SFB (trzeci pasaż, n = 10 pacjentów z RA) przez TNF-a i IL-1. in vitro. Lokalizacja immunohistologiczna w SFB przy użyciu mAb D3B6 wykazała, że IL-18 była obecna po (c), ale nie wcześniej (d), stymulacji TNF-a. i IL-1 .. Omówienie Obecne badania miały na celu zbadanie roli IL-18 w regulacji odpowiedzi Th1 w błonie maziowej RA. Nasze dane sugerują, że IL-18 może rzeczywiście promować odpowiedź Th1 stawu, ale może również działać bezpośrednio na makrofagi, aby indukować prozapalną produkcję cytokin. [więcej w: atom gliwice, szypryt chojnice, zoz nidzica ]